基于多肽组学筛选的桑叶源ACE抑制肽构效关系解析与体内外功能验证
摘要:本研究以新鲜桑叶为材料,采用超声波辅助水提酸沉法提取桑叶蛋白,经芽孢杆菌蛋白酶在底物浓度20 g/L、加酶量7.5%、温度60 ℃、pH7.0、酶解50 min制备桑叶蛋白ACE抑制多肽,利用高效液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)对酶解多肽进行分离鉴定与序列解析,结合潜在活性评分与理化性质预测,并通过与ACE分子进行半柔性分子对接,筛选高活性ACE抑制肽,采用固相化学合成法获得目标多肽,基于EA.hy926细胞模型,通过检测细胞活力、ELISA 定量血管活性因子分泌水平,以及Westerm blot分析信号通路蛋白表达,系统评估肽段的细胞毒性和生理调节作用,以期为桑叶源ACE抑制肽在降压功能食品与药物研发领域的应用提供理论依据和实验支持。